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本试剂盒是一种快速的可用于SDS-PAGE或非变性PAGE等蛋白银染染色的试剂盒，该试剂盒含有增敏步骤，可明显降低背景。快速银染与常规银染相比，前者操作速度更快，但检测灵敏度(0.5～10ng蛋白/条带)可能略低于后者，尤其是在检测小分子量蛋白质的时候。

• 10×Silver Stain Stop Buffer呈酸性，有轻微腐蚀性，使用时请作必要防护。
  
• 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
  
• 试剂开封后请尽快使用，以防影响后续实验效果。

• 准备工作：以下操作以8.5×5.5cm、厚度为1.0mm的凝胶为例，以凝胶全部浸没到溶液为准，一般用量是25mL，对于凝胶体积较大的，各溶液的使用量需按凝胶体积比例放大。整个银染过程应在摇床上进行，摇床转速控制在60～70rpm，提前配制固定液，即按无水乙醇∶冰乙酸∶去离子水=5∶1∶4的比例配制；提前配制洗涤液，即按无水乙醇：去离子水=1：4的比例配制。
  
• 水洗：电泳结束后，取凝胶放入去离子水中清洗2次，每次5min。
  
• 固定：取凝胶放入50～100mL固定液中，在摇床上室温摇动15～20min，重复固定步骤1次。
  
• 洗脱：取凝胶放入洗涤液中清洗2次，每次5min。
  
• 水洗：去离子水清洗凝胶2次，每次5min。
  
• 增敏：配制银染增敏工作液，即取500×Silver Stain Sensitizer 0.1mL加入到50mL去离子水中，混匀，即为1×Silver Stain Sensitizer，一般应2h内用完；室温下用1×Silver Stain Sensitizer孵育凝胶2min，立即用去离子水清洗凝胶2次，每次1min。
  
• 银染：配制银染工作液，即取100×Silver Stain 0.5mL加入到50mL去离子水中，混匀，即得1×Silver Stain，一般应2h内用完；取凝胶入1×Silver Stain，在摇床上室温摇动10～20min。
  
• 水洗：弃液，在摇床上用去离子水清洗凝胶2次，每次30s，摇动速度在60～70rpm，总的水洗时间应控制在1.5min内。
  
• 显影：配制银染显影工作液，即取5×Silver Stain Developer 10mL加入到40mL去离子水中，混匀，即为1×Silver Stain Developer，一般应30min内用完，清洗凝胶后立即置于1×Silver Stain Developer中，室温孵育2～10min，直至蛋白条带清晰可见；一般显色30s后就会出现棕色沉淀，继续显影2～3min，亦可延长至5min以上，如果显影效果不佳，可重新更换1×Silver Stain Developer继续显影。
  
• 终止：配制银染终止液，即取10×Silver Stain Stop Buffer 10mL加入到90mL去离子水中，混匀，即为1×Silver Stain Stop Buffer，迅速用去离子水清洗凝胶以避免显影过度，背景染色，立即加入银染终止液，摇床上摇动10min，以终止显色反应。
  
• 保存：弃终止液，加入去离子水50mL，摇床上摇动2～5min，弃液，短期保存于新鲜去离子水，长期保存可以制备干胶。

• 背景过深：
  显色时间过长；洗涤不充分；凝胶中残留物质未去除干净；去离子水的纯度过低。
  
• 蛋白条带较浅：
  蛋白的半胱氨酸含量过低；银染后水洗时间过长；蛋白量较低；固定后的洗涤时间不够，导致乙酸残留。
  
• 凝胶上出现杂质或非蛋白的印迹：
  凝胶没有被充分浸没，应加入足量溶液；容器没有清洗干净；凝胶接触金属物质；指纹或其他压迹。